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X-α-Gal是一种酵母半乳糖苷酶(MEL1)的显色底物，用于在培养基上直接检测GAL4系统的酵母双杂交作用。通过蓝白颜色筛选，快速和简便地识别阳性的蓝色克隆，无需费时的β-半乳糖苷酶报告基因检测。

X-α-Gal检测酵母MEL1基因的激活。MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因，编码分泌型的α-半乳糖苷酶。该酶可水解无色的X-α-Gal底物并最终产生蓝色产物。表达α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培养基上显蓝色，即阳性的双杂交作用。

• α-半乳糖苷酶的显色底物，形成蓝色沉淀。在培养基上直接检测酵母双杂交相互作用，利用此底物可以省去双杂交体系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays；
  
• 用于区分肠杆菌科内的不同菌种以及区分双歧杆菌和乳酸菌；
  
• 在组织化学中用于酶活性的检测。

• 涂布于预制平板：
  
  • 溶解24mg X-α-gal于6mL DMF，终浓度为4mg/mL。
    
  • 涂布200μL(15cm)或者100μL（10cm）X-α-gal储存液于预制平板上；
    
  • 置于37℃培养箱至液体被吸收（由于DMF挥发性低，最长可放4小时）；
    
  • 将转化细菌或酵母涂于平板上，于37℃或30℃培养直至蓝色菌落出现。
• 直接加入琼脂中：
  
  • 溶解60mg X-α-gal于3mL DMF，终浓度为20mg/mL。
    
  • 将已灭菌琼脂培养基冷却至50～55℃；
    
  • 向上述培养基中加入20mg/mL X-α-Gal，比例为每升培养基中加入1mL X-α-Gal溶液。